■ Yuqori moslashuvchanlik: boshlang'ich namuna hajmining yovvoyi diapazoni, bitta reaksiyada katta hajmli namuna olish uchun mos.
■ Yuqori rentabellik: yog'ingarchilik usuli namunadagi RNK hosilini maksimal darajada oshiradi.
■ Keng foydalanish: O'simlik va hayvon to'qimalari, madaniy hujayralar, qon, tana suyuqligi va boshqalar kabi turli xil namunalarga mos keladi.
■ Tez operatsiya: Genomik DNKni 1 soat ichida olish mumkin.
Turi: Yog'ingarchilik
Namuna: Viruslar, bakteriyalar, qo'ziqorinlar, hayvonlar, o'simlik to'qimalari, o'stirilgan hujayralar va tana suyuqligi.
Maqsad: RNK
Ish vaqti: ~ 1 soat
Ilovalar: TRNzol Universal reaktivi tozalangan umumiy RNK tarkibidagi DNK va oqsillar kabi iflosliklarning ifloslanishini kamaytiradi va to'g'ridan -to'g'ri Northern Blot, Dot Blot, PolyA skriningi, in vitro tarjima, RNazadan himoya qilish tahlili, cDNA kutubxonasi qurilishi kabi turli molekulyar biologik tajribalar uchun ishlatilishi mumkin. , RT-PCR, real vaqtda PCR va yuqori o'tkazuvchanlik ketma-ketligi.
Barcha mahsulotlar ODM/OEM uchun moslashtirilishi mumkin. Tafsilotlar uchun,Iltimos, moslashtirilgan xizmatni (ODM/OEM) bosing
Usul: 30 mg kalamushli jigar to'qimasi, 100 mg guruch barglari suyuq azotli silliqlash yo'li bilan yig'ilgan; 1 × 106HepG2 o'stirilgan hujayralar va 700 ml Saccharomyces Cerevisiae kultivatori (OD600 = 0,9) santrifüj orqali yig'ildi. TIANGENdan 1 ml TRNzol universal reaktivi va L va T etkazib beruvchidan tegishli mahsulotlar namunaning har bir qismiga qo'shildi va RNK ekstraktsiyasi har bir etkazib beruvchi tomonidan taqdim etilgan protokollarga muvofiq amalga oshirildi. To'rtta namuna uchun ellyusiya hajmi mos ravishda 80 ml, 50 ml, 30 ml va 30 ml ni tashkil etdi. Har bir bo'lakka 3 ml eluat yuklandi.
MIII: TIANGEN Marker III;
Elektroforez 1% agarozda 30 minut davomida 6 V/sm tezlikda o'tkazildi.
Natijalar: TIANGEN TRNzol universal reagenti kalamush jigari, guruch barglari, o'stirilgan hujayralar va xamirturush namunalaridan yuqori samaradorlik bilan yuqori poklik va yaxshi yaxlitlikdagi RNK chiqarishi mumkin. RNK sifati L va T mahsulotlarini etkazib beruvchilarnikiga o'xshash yoki undan biroz yuqori.
A-1 Hujayra lizisi yoki homogenlash etarli emas
---- Namuna ishlatishni kamaytiring, lizis buferi miqdorini oshiring, homogenlash va lizis vaqtini oshiring.
A-2 Namuna miqdori juda katta
---- Amaldagi namuna miqdorini kamaytiring yoki lizis buferi miqdorini oshiring.
A-1 Hujayra lizisi yoki homogenlashuvi etarli emas
---- Namuna ishlatishni kamaytiring, lizis buferi miqdorini oshiring, homogenlash va lizis vaqtini oshiring.
A-2 Namuna miqdori juda katta
---- Iltimos, maksimal ishlov berish quvvatiga qarang.
A-3 RNK kolondan to'liq chiqarilmaydi
---- RNazsiz suv qo'shgandan so'ng, santrifüjdan oldin uni bir necha daqiqaga qoldiring.
A-4 erituvchi tarkibidagi etanol
---- Yuvib bo'lgach, yana santrifüjdan o'tkazing va iloji boricha yuvish tamponini olib tashlang.
A-5 Hujayra madaniyati muhiti to'liq olib tashlanmagan
---- Hujayralarni yig'ishda, iloji boricha madaniyat muhitini olib tashlashga ishonch hosil qiling.
A-6 RNK do'konida saqlanadigan hujayralar samarali santrifüj qilinmaydi
---- RNKstore zichligi o'rtacha hujayra madaniyati muhitidan katta; shuning uchun markazdan qochish kuchini oshirish kerak. 3000x grammda santrifüj qilish tavsiya etiladi.
A-7 RNK pastligi va namunadagi ko'pligi
---- Kam rentabellik namunadan kelib chiqqanligini aniqlash uchun musbat namunadan foydalaning.
A-1 Materiallar yangi emas
---- Yangi to'qimalarni ekstraktsiya effektini ta'minlash uchun zudlik bilan suyuq azotda saqlash yoki darhol RNKstore reaktiviga kiritish kerak.
A-2 Namuna miqdori juda katta
---- Namuna miqdorini kamaytiring.
A-3 RNaza ifloslanishin
---- To'plamda berilgan buferda RNaz bo'lmasa-da, ekstraktsiya jarayonida RNazni ifloslantirish oson va uni ehtiyotkorlik bilan ishlatish kerak.
A-4 Elektroforezning ifloslanishi
---- Elektroforez tamponini almashtiring va sarf materiallari va yuklash buferi RNaz bilan ifloslanmaganligiga ishonch hosil qiling.
A-5 Elektroforez uchun juda ko'p yuklanish
---- Namuna yuklanishini kamaytiring, har bir quduqning yuklanishi 2 mkg dan oshmasligi kerak.
A-1 Namuna miqdori juda katta
---- Namuna miqdorini kamaytiring.
A-2 Ba'zi namunalarda DNK miqdori yuqori va ularni DNase bilan davolash mumkin.
---- Olingan RNK eritmasiga RNazsiz DNaz bilan ishlov berishni amalga oshiring va RNKni davolashdan so'ng keyingi tajribalar uchun to'g'ridan-to'g'ri ishlatish mumkin yoki RNKni tozalash to'plamlari yordamida yanada tozalash mumkin.
150 ° C da 4 soat pishirilgan shisha idishlar uchun. Plastik idishlar uchun 0,5 M NaOHga 10 min botiriladi, so'ngra RNazsiz suv bilan yaxshilab yuviladi va keyin sterilizatsiya qilinadi va RNazni butunlay olib tashlanadi. Tajribada ishlatiladigan reaktivlar yoki eritmalar, ayniqsa suvda RNaz bo'lmasligi kerak. Barcha reagent preparatlari uchun RNazsiz suvdan foydalaning (toza shisha idishga suv qo'shing, 0,1% (V/V) oxirgi konsentratsiyasiga DEPC qo'shing, bir kechada silkiting va avtoklav qiling).
Fabrikamız tashkil etilganidan buyon ushbu printsipga rioya qilgan holda birinchi darajali jahon mahsulotlarini ishlab chiqarmoqda
birinchi navbatda sifat. Mahsulotlarimiz yangi va eski xaridorlar orasida sanoatda katta obro'ga ega bo'ldi.