TGuide plazma DNK ekstraktsiyasi to'plami (1,2 ml)

A-1 Boshlang'ich namunadagi hujayralar yoki virusning past kontsentratsiyasi-Hujayralar yoki viruslarning konsentratsiyasini boyitish.

A-2 Namunalarning etarli darajada lizisi yo'q-namunalar lizis buferi bilan yaxshilab aralashtirilmagan. Puls-vorteks yordamida 1-2 marta yaxshilab aralashtirish tavsiya etiladi. - Proteinaz K faolligining pasayishi natijasida hujayralar lizisining etarli emasligi - Hujayra lizisining etarli emasligi yoki issiq hammom vaqtining etarli emasligi tufayli oqsil degradatsiyasi. Lizatdagi barcha qoldiqlarni olib tashlash uchun to'qimalarni mayda bo'laklarga bo'lish va cho'milish vaqtini uzaytirish tavsiya etiladi.

A-3 DNK adsorbsiyasining etarli emasligi. -100% etanol o'rniga hech qanday etanol yoki past foiz qo'shilmagan.

A-4 Tozalash buferining pH qiymati juda past. -pH ni 8.0-8.3 gacha sozlang.

Eluentda qolgan etanol.

- Eluentda qoldiq yuvish buferli PW mavjud. Etanolni aylantirish ustunini 3-5 daqiqa davomida santrifüjlash, so'ngra xona haroratiga yoki 50 ℃ inkubatorga 1-2 daqiqaga qo'yish orqali olib tashlash mumkin.

A-1 Namuna yangi emas. - Namunadagi DNK buzilganligini aniqlash uchun nazorat sifatida ijobiy DNK namunasini oling.

A-2 noto'g'ri oldindan davolash. - Haddan tashqari suyuq azotni silliqlash, namlikni qaytarish yoki namuna juda ko'p bo'lishi oqibatida.

Oldindan ishlov berish har xil namunalar uchun farq qilishi kerak. O'simlik namunalari uchun suyuq azotni yaxshilab maydalashga ishonch hosil qiling. Hayvonlar namunalari uchun suyuq azotda homogenat yoki yaxshilab maydalang. G+ bakteriyasi va xamirturush singari sindirish qiyin bo'lgan hujayra devorlari bo'lgan namunalar uchun hujayra devorlarini sindirish uchun lizozim, litikaza yoki mexanik usullardan foydalanish tavsiya etiladi.

4992201/4992202 O'simlik genomli DNK to'plami ekstraksiya uchun xloroformni talab qiladigan ustunli usulni o'zlashtiradi. Bu, ayniqsa, har xil o'simlik namunalariga, shuningdek o'simlik quruq kukuniga mos keladi. Hi-DNAsecure O'simliklar to'plami ham ustunlarga asoslangan, ammo fenol/xloroform ekstraktsiyasini talab qilmasdan, uni xavfsiz va toksik bo'lmagan holga keltiradi. Bu polisakkaridlar va polifenol miqdori yuqori bo'lgan o'simliklar uchun javob beradi. 4992709/4992710 DNAquick o'simlik tizimi suyuqlikka asoslangan usulni qo'llaydi. Fenol/xloroform ekstraktsiyasi ham kerak emas. Tozalash protsedurasi oddiy va tezdir, namuna boshlang'ich miqdori cheklanmagan, shuning uchun foydalanuvchilar eksperimental talablarga muvofiq miqdorni moslashuvchan tarzda sozlashi mumkin. GDNA bo'laklarining katta hajmini yuqori rentabellik bilan olish mumkin.

Genomik DNK TIANamp Blood DNA DNK to'plami yordamida odamlarning turli xil hajmli qon namunalaridan olingan. Natijalar quyidagicha. Natijalar faqat ma'lumotnoma sifatida keltirilgan, qazib olishning haqiqiy natijalari namunalar shartlariga bog'liq.

Qon pıhtısının DNKini olish, bu ikki to'plamda berilgan reaktivlar yordamida, faqat protokolni qon quyqasi DNKini olish bo'yicha maxsus ko'rsatmaga o'zgartirish orqali amalga oshirilishi mumkin. Qon pıhtısının DNK olish protokolining yumshoq nusxasi so'rov bo'yicha berilishi mumkin.

Yangi namunani 1 ml PBS, oddiy sho'r suv yoki TE tampon bilan to'xtatib turing. Namunani homogenizator yordamida to'liq bir hil holga keltiring va cho'kindi santrifüjlash yo'li bilan kolba tubiga yig'iladi. Yuqori qatlamni to'kib tashlang va cho'kmani 200 ml GA tampon bilan qayta tushiring. Quyidagi DNKni tozalash ko'rsatmalarga muvofiq amalga oshirilishi mumkin.

Plazma, zardob va tana suyuqligi namunalarida gDNKni tozalash uchun TIANamp Micro DNK to'plami tavsiya etiladi. GDNA virusini sarum/plazma namunalaridan tozalash uchun TIANamp Virusli DNK/RNK to'plami tavsiya etiladi. Zardob va plazma namunalaridan bakterial gDNKni tozalash uchun TIANamp Bacteria DNK to'plami tavsiya etiladi (musbat bakteriyalar uchun lizozim qo'shilishi kerak). Tuprik namunalari uchun Hi-Swab DNK to'plami va TIANamp bakteriyalar DNK to'plami tavsiya etiladi.

Qo'ziqorin genomini ekstraktsiya qilish uchun DNAsecure Plant Kit yoki DNAquick Plant System tavsiya etiladi. Xamirturush genomini olish uchun TIANamp Xamirturush DNK to'plami tavsiya etiladi (lititsaza o'z-o'zidan tayyorlanishi kerak).